在腫瘤細(xì)胞體外實(shí)驗(yàn)中，培養(yǎng)基選型直接決定細(xì)胞生長狀態(tài)，選錯(cuò)培養(yǎng)液易出現(xiàn)貼壁脫落、增殖遲緩、批量凋亡等問題。本文依托實(shí)驗(yàn)室通用培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，匯總 9 種高頻使用癌細(xì)胞系的培養(yǎng)基選用方案，按貼壁實(shí)體瘤、懸浮血液瘤、雙配方兼容細(xì)胞三類劃分，方便科研人員快速查閱。

第一類：
貼壁型實(shí)體癌細(xì)胞，主流選用 DMEM 系列培養(yǎng)基。

l HeLa宮頸癌細(xì)胞固定采用高糖 DMEM，細(xì)胞完-全貼壁生長，高糖配方充足碳源匹配宮頸癌細(xì)胞高速增殖特性，是轉(zhuǎn)染、基因編輯常用模式細(xì)胞；

l MCF-7乳腺癌細(xì)胞同樣標(biāo)配 DMEM，上皮源性細(xì)胞依賴 DMEM 豐富的氨基酸配比，長期更換 RPMI1640 會引發(fā)大量漂浮死細(xì)胞。

l A549肺癌細(xì)胞優(yōu)選 F-12K 培養(yǎng)基，實(shí)驗(yàn)室缺料時(shí)可用 DMEM 臨時(shí)替代短期傳代；

l HepG2肝癌細(xì)胞有兩種培養(yǎng)方案，單用 MEM 或 DMEM，也可將兩種培養(yǎng)基混合配比培養(yǎng)，混合配方更貼合肝細(xì)胞代謝特點(diǎn)，多用于藥物肝毒性篩選實(shí)驗(yàn)。

上述四種貼壁細(xì)胞均離不開 DMEM 體系支撐。

第二類：
血液來源懸浮癌細(xì)胞，統(tǒng)一使用 RPMI-1640 培養(yǎng)基。
Jurkat（T 細(xì)胞白血?。?、K562（慢性骨髓白血病）、U266（多發(fā)性骨髓瘤）三類細(xì)胞為全懸浮生長，RPMI-1640 含次黃嘌呤、VB12 等特-有營養(yǎng)，是這類血液腫瘤細(xì)胞必需養(yǎng)分，無法用 DMEM 長期替代。懸浮細(xì)胞換液不能直接棄除上清，需要離心收集細(xì)胞后補(bǔ)加新鮮完-全培養(yǎng)基，避免細(xì)胞損耗。

第三類：

半貼壁特殊腫瘤細(xì)胞，可兩種培養(yǎng)基靈活切換。

l PC3 前列腺癌細(xì)胞既能用高糖 DMEM，也可選用 RPMI-1640：大規(guī)模擴(kuò)增保種優(yōu)先 DMEM，細(xì)胞貼壁牢固、收獲數(shù)量更高；

l 藥物凋亡篩選用 RPMI-1640，半懸浮狀態(tài)便于藥物和細(xì)胞充分接觸。HCT116 結(jié)腸癌細(xì)胞首-選 McCoy's 5A，庫存不足時(shí)臨時(shí)替換 RPMI-1640，常規(guī)不推薦 DMEM 培養(yǎng)。

實(shí)操小貼士：所有完-全培養(yǎng)液需添加 10% 胎牛血清 + 雙抗；如需更換培養(yǎng)基，要梯度逐步馴化，禁止一次性全量換液，降低環(huán)境突變帶來的細(xì)胞應(yīng)激損傷。掌握不同癌細(xì)胞的培養(yǎng)基適配規(guī)律，能有效提升細(xì)胞存活率，保障后續(xù)藥理、分子實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)穩(wěn)定性。

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